Tinción de Giemsa

La tinción de Giemsa es un método habitual para el examen de frotis sanguíneos, cortes histológicos y otro tipo de muestras biológicas. Este método tiene utilidad sobre todo para poner de manifiesto las rickettsias localizadas dentro de las células huéspedes. La coloración de giemsa se emplea también para teñir frotis de sangre en el examen para protozoos. Se puede emplear, como variaciones, otras coloraciones como es la técnica de citoconcentración para parásitos sanguíneos, la cual tiene un bajo coste y ofrece la posibilidad de aislar e identificar en el mismo sedimento el parásito principal, con excepción de los trofozoitos jóvenes y el Plasmodium falciparum. También se emplea la modificación de Wright. Este método de tinción permite también la tinción diferencial de zonas con un alto contenido de ADN, y concretamente de uniones A-T. Esto permite distinguir perfectamente en microscopio óptico el núcleo celular, los cromosomas durante la mitosis, y en algunos casos, incluso el ADN mitocondrial(kinetoplasto de algunos protozoos, como Trypanosoma). Los cromosomas pueden ser tratados con varios compuestos químicos que producen la alternancia de bandas claras y oscuras a lo largo de los cromosomas. Cada cromosoma tiene un patrón de bandas característico, permitiendo que aberraciones estructurales como borrados, duplicaciones o sutiles translocaciones sean detectadas, al igual que permite la identificación de cromosomas marcadores.

La técnica radica en la disociación controlada de las sales de eosinato que ocurre al insolubilizar la mezcla del giemsa por disolución en H2O destilada; la eosina así liberada colorea el componente extracelular y determinadas extructuras acidófilas; y los derivados de azur, las estructuras de carácter basófilo. La cromatina nuclear adopta una tinción azul violeta.
1º- Desparafinar.
Estufa durante 30 min. a 60ºC
Sumergimos en xilol durnate 10 o 15 min.
7º- Alcohol de 96º- 2-3 pases rápidos.
2º- Hidratación.
Alcohol absoluto-5min.
Alcohol 96º -5min.
Alcohol 70º -5min.
8º- Alcohol isopropílico -3 min.
3º- Lavar en H2O destilada.
9º - Alcohol isopropílico -3 min.
4º- Solución Giemsa al 20 %- 45 min.
10º- Xilol.
5º -Lavar con agua corriente 5 - 10min.
11º- Montar.
6º-Alcohol 70º - 2-3 pases rápidos

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